2025-05-08 06:13:46
干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。解決的方法是:(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí);(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”,直到柱子的下端不再發(fā)燙,恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無(wú)論使用哪種方法裝柱,都要求所裝的柱子結(jié)實(shí)、勻稱、無(wú)氣泡。上樣也有濕法和干法之分:濕法一般用淋洗劑溶解樣品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等,但溶劑越少越好。再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液,沿著層析柱內(nèi)壁緩慢地均勻加入。在不用海沙的情況下,盡量不要破壞硅膠面。加樣后,打開柱底活塞,讓固定相充分地吸附所加樣品。然后再加入一些洗脫劑,再充分地吸附后將一團(tuán)脫脂棉塞至接近硅膠表面。源景層析柱,助力生物類似藥開發(fā)!廈門玻璃PP層析柱供應(yīng)商
柱層析操作時(shí),先在圓柱管中先填充不溶性基質(zhì),形成一個(gè)固定相。將樣品加到柱子上,用特殊溶劑洗脫,溶劑組成流動(dòng)相。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中,根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。柱層析的上樣也有干法和濕法之分:干法就是把待分離的樣品用少量溶劑溶解后,在加入少量硅膠,拌勻后再旋去溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層。干法上樣較麻煩,但可以保證樣品層很平整。濕法上樣就是用少量溶劑(比較好就是展開劑,如果展開劑的溶解度不好,則可以用一極性較大的溶劑,但必須少量)將樣品溶解后,再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液,沿著層析柱內(nèi)壁均勻加入。然后用少量溶劑洗滌后,再加入。實(shí)驗(yàn)室玻璃層析柱規(guī)格江陰源景智能科技的層析柱,分離精度高效果好。
玻璃層析柱是一種基于色譜原理的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,使用一定的填料將樣品溶液或混合物分離成不同組分。它由一個(gè)玻璃柱體和填料組成,一般使用硅膠、脫色凝膠、DEAE-Sepharose、Sephadex等填料。其特點(diǎn)如下:1、高分離效率和高分辨率通過使用不同粒度和不同種類的填料,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)不同分子的選擇性吸附和排除,從而達(dá)到高效分離和純化的目的。同時(shí),玻璃層析柱具有高分辨率,能夠有效地分離結(jié)構(gòu)相似但性質(zhì)不同的化合物。2、靈活性和可重復(fù)性填料種類和條件的調(diào)整能夠使得層析柱在不同樣品和實(shí)驗(yàn)需要下進(jìn)行適應(yīng)性調(diào)整,同時(shí),由于層析柱可以重復(fù)使用和再填充,因此具有較高的成本效益。
定期檢查和維護(hù)純化柱的設(shè)備和部件。定期檢查柱子的密封性、連接件和流通系統(tǒng)的工作狀態(tài),確保其正常運(yùn)行和可靠性。及時(shí)更換磨損的部件,保持設(shè)備的穩(wěn)定性和性能。層析柱(chromatographycolumn)是一種常用的分離技術(shù)設(shè)備,它廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、制藥等領(lǐng)域。層析柱基于不同成分在流動(dòng)相和固定相之間的相互作用力的差異,將混合物中的組分分離出來。層析柱通常由一個(gè)空心的長(zhǎng)管構(gòu)成,內(nèi)部填充著一種特殊材料,稱為層析劑(chromatographymedia),它可以分為吸附劑、凝膠劑和離子交換劑等多種類型。該柱的操作原理是將待分離混合物溶液樣品加入柱中,然后通過流動(dòng)相(eluent)的驅(qū)動(dòng),讓混合物中的成分因其與層析劑之間的相互作用力差異而逐漸分離出來,終得到單個(gè)純度高的組分。預(yù)裝柱保存液優(yōu)化,開箱即用!
由于親和吸附達(dá)到平衡比較慢,所以特異性洗脫往往需要較常的時(shí)間和較大的洗脫條件,可以通過適當(dāng)?shù)母淖兤渌鼦l件,如選擇親和力強(qiáng)的物質(zhì)洗脫、加大洗脫液濃度等等,來縮小洗脫時(shí)間和洗脫體積。非特異性洗脫是指通過改變洗脫緩沖液pH、離子強(qiáng)度、溫度等條件,降低待分離物質(zhì)與配體的親和力而將待分離物質(zhì)洗脫下來。當(dāng)待分離物質(zhì)與配體親和力較小時(shí),一般通過連續(xù)大體積平衡緩沖液沖洗,就可以在雜質(zhì)之后將待分離物質(zhì)洗脫下來,這種洗脫方式簡(jiǎn)單、條件溫和,不會(huì)影響待分離物質(zhì)的活性。但洗脫體積一般比較大,得到的待分離物質(zhì)濃度較低。江陰源景層析柱,能有效提升您的實(shí)驗(yàn)效率和質(zhì)量。廈門玻璃PP層析柱供應(yīng)商
江陰源景智能科技有限公司的層析柱,保障分離工作順利。廈門玻璃PP層析柱供應(yīng)商
當(dāng)待分離物質(zhì)和配體結(jié)合較強(qiáng)時(shí),可以通過選擇適當(dāng)?shù)膒H、離子強(qiáng)度等條件降低待分離物質(zhì)與配體的親和力,具體的條件需要在實(shí)驗(yàn)中摸索。可以選擇梯度洗脫方式,這樣可能將親和力不同的物質(zhì)分開。如果希望得到較高濃度的待分離物質(zhì),可以選擇酸性或堿性洗脫液,或較高的離子強(qiáng)度一次快速洗脫,這樣在較小的洗脫體積內(nèi)就能將待分離物質(zhì)洗脫出來。層析柱使用指南,幫您在實(shí)驗(yàn)過程中從容應(yīng)對(duì)各種突發(fā)狀況,更好的完成實(shí)驗(yàn)操作。1.層析柱進(jìn)氣泡怎么辦?空氣進(jìn)入,如緩沖液走空,連接進(jìn)入系統(tǒng)過程中○用純水反向沖洗,如果有柱位閥可直接切換流向,沒有的話可將柱子反接○對(duì)于大多數(shù)層析柱來說可用乙醇沖洗,以提高排氣效率廈門玻璃PP層析柱供應(yīng)商