2025-07-11 03:15:27
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實時熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達(dá)分析、病毒檢測和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢,成為眾多科研工作者的優(yōu)先試劑盒。簡化操作流程,降低污染風(fēng)險One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中完成。這種設(shè)計不僅簡化了實驗操作步驟,減少了人為誤差,還有效降低了因反復(fù)開蓋導(dǎo)致的樣品污染風(fēng)險。例如,傳統(tǒng)的兩步法需要分別進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作復(fù)雜且污染風(fēng)險較高,而一步法試劑盒則避免了這些問題。高靈敏度與高特異性該試劑盒使用高效的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠顯著提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。其檢測靈敏度可達(dá)極低濃度的RNA樣本,例如在某些實驗中,即使RNA濃度低至0.1 pg,也能實現(xiàn)精細(xì)檢測。此外,試劑盒中添加了抑制非特異性擴(kuò)增的組分,確保熔解曲線呈現(xiàn)單峰,進(jìn)一步提高了檢測的準(zhǔn)確性。蛋白在表達(dá)過程中形成包涵體,需要通過復(fù)性步驟恢復(fù)其活性。這通常涉及物質(zhì)的存在下進(jìn)行蛋白質(zhì)的重折疊。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FOLR1 Protein,His Tag
Taq DNA Polymerase:科研中的關(guān)鍵工具Taq DNA Polymerase 是一種應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,其獨(dú)特的性能和特點(diǎn)使其成為PCR技術(shù)的重要工具。產(chǎn)品特點(diǎn)Taq DNA Polymerase 的特點(diǎn)是其出色的耐熱性。該酶來源于嗜熱菌Thermus aquaticus,能夠在高溫條件下保持活性,適催化溫度為75-80℃,即使在95℃下保溫半小時,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能夠在PCR反應(yīng)中高效地合成DNA鏈。然而,它缺乏3'→5'校正活性,這意味著在擴(kuò)增過程中可能會引入少量錯誤,但對于大多數(shù)常規(guī)PCR應(yīng)用而言,這種特性并不影響其好的使用。Taq酶的另一個重要特性是其5'→3'外切酶活性,這一特性使其在探針法qPCR中具有獨(dú)特的優(yōu)勢。此外,Taq酶在PCR產(chǎn)物的3'末端會添加一個A堿基,這使得PCR產(chǎn)物可以直接用于TA克隆。Recombinant Human B7-H5/Gi24/VISTA(His Tag)這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進(jìn)的熱啟動Taq酶技術(shù),通過化學(xué)修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應(yīng)的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴(kuò)增,顯著提高了反應(yīng)的靈敏度,即使對于低豐度的靶基因,也能實現(xiàn)檢測。例如,在檢測稀有突變基因時,其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準(zhǔn)確識別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨(dú)特的緩沖體系經(jīng)過優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結(jié)合過程。在反應(yīng)過程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時增強(qiáng)引物與目標(biāo)模板的特異性結(jié)合能力。這使得在復(fù)雜的基因組背景下,目標(biāo)基因得以高效擴(kuò)增,從而顯著提高了qPCR反應(yīng)的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測中,這種高特異性優(yōu)勢尤為明顯,能夠避免因引物錯配導(dǎo)致的非目標(biāo)基因擴(kuò)增,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
GoldenView 吖啶橙核酸染料:**高效的核酸可視化工具GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種新型的核酸染色劑,可替代傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳和細(xì)胞染色實驗。它與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號,其靈敏度與EB相當(dāng),但在**性方面更具優(yōu)勢。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度:GoldenView與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生明亮的熒光信號,雙鏈DNA在紫外光下呈現(xiàn)綠色熒光,而單鏈DNA或RNA呈現(xiàn)紅色熒光。**性高:與EB不同,GoldenView在多項致突變性試驗中未表現(xiàn)出致疾病性,對皮膚和眼睛的刺激性較小。適用范圍廣:不僅適用于DNA染色,還可用于RNA染色,同時可用于細(xì)胞凋亡檢測。應(yīng)用場景瓊脂糖凝膠電泳:用于檢測DNA片段和RNA條帶,尤其適合大片段DNA的檢測。細(xì)胞染色:用于區(qū)分正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞,常與碘化丙啶(PI)聯(lián)合使用。細(xì)胞凋亡檢測:吖啶橙可穿透細(xì)胞膜,結(jié)合細(xì)胞核DNA,用于熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀分析。GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種高效、**的核酸染色試劑,適用于多種實驗場景。其雙重?zé)晒馓匦允蛊湓诤怂犭娪竞图?xì)胞研究中表現(xiàn)出色,是實驗室中理想的EB替代品。研究表明,優(yōu)化后的Cas12a系統(tǒng)在多種細(xì)胞類型中表現(xiàn)出良好的編輯效率。
在分子生物學(xué)研究中,RNA的完整性分析是評估RNA質(zhì)量和功能的重要環(huán)節(jié)。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液,在RNA電泳實驗中發(fā)揮著不可或缺的作用。本文將詳細(xì)介紹10×RNALoadingBuffer的產(chǎn)品特點(diǎn)和性能。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高濃度設(shè)計10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,使用時需稀釋至1×。這種高濃度設(shè)計減少了試劑的使用量,同時保證了樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍(lán)(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)兩種示蹤染料。溴酚藍(lán)在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個堿基的RNA遷移速率相當(dāng),而二甲苯青則與約5000個堿基的RNA遷移速率相當(dāng)。這種雙重示蹤設(shè)計能夠直觀地反映電泳的進(jìn)程,幫助實驗人員準(zhǔn)確判斷RNA的遷移情況。無RNase污染RNA分子對RNase極為敏感,因此在RNA實驗中,避免RNase污染是關(guān)鍵。10×RNALoadingBuffer經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保無RNase雜質(zhì)污染,從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳,也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。許多Probe qPCR Mix (2×)產(chǎn)品采用熱啟動DNA聚合酶,能減少非特異性擴(kuò)增,提高反應(yīng)的靈敏度和特異性 。Recombinant Mouse CD229/SLAMF3 Protein,His Tag
通過工程化改造,如將FnCas12a與單鏈DNA外切酶融合,可以提高基因編輯效率,擴(kuò)大FnCas12a可以靶向的范圍 。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FOLR1 Protein,His Tag
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細(xì)菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準(zhǔn)確性和熱穩(wěn)定性而被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨(dú)特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準(zhǔn)確擴(kuò)增的實驗(如基因克隆、突變研究和測序準(zhǔn)備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟。其擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶擴(kuò)增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域廣,包括高保真PCR、基因克隆、點(diǎn)突變、全基因合成以及高質(zhì)量測序樣本的準(zhǔn)備。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結(jié)合高保真性和快速擴(kuò)增的優(yōu)點(diǎn)??傊琍fu DNA聚合酶憑借其高保真性、熱穩(wěn)定性和廣的應(yīng)用場景,已成為分子生物學(xué)實驗中不可或缺的工具,為科學(xué)研究提供了強(qiáng)有力的支持。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FOLR1 Protein,His Tag